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Pasteur-Färbung Kernfärbungsprozess (Anbringen von Objektträgern)

Erstellt 06.15
Pasteur-Färbung Kernfärbungsprozess (Anbringen von Objektträgern)
  1. Die Einweichzeit der Hämatoxylinlösung beträgt im Allgemeinen 3-5 Minuten, muss aber je nach Temperatur und Brennstoffbedingungen angepasst werden. Im Sommer oder bei Verwendung von Hämatoxylinfarbe, die lange gelagert wurde, sollte die Färbezeit verkürzt werden; Winter oder neu zubereitete Hämatoxylinfarblösung und verdünnte Hämatoxylinfarblösung, die lange verwendet wurde, sind nicht leicht zu färben, und die Zeit sollte verlängert werden. Es gibt im Allgemeinen zwei Methoden zur Verwendung der Hämatoxylinfärbung:
  1. Überfärbungsmethode: Zuerst bewusst eine Tiefenfärbung durchführen und dann einen Säureaufschluss mit Salzsäure vornehmen, um die Kernfärbung besser anzupassen. Diese Methode kann den während des Ansäuerungsprozesses am Zytoplasma haftenden überschüssigen Hämatoxylin-Farbstoff entfernen, wodurch die Zytoplasmafärbung lebendiger und klarer wird. Sie wird häufig für Präparate mit hohem Schleimgehalt verwendet.
  2. Leichte Färbemethode: Im Prozess der Kernfärbung sollte die Färbezeit streng kontrolliert werden, um eine angemessene Kernfärbung ohne Salzsäure-Ansäuerung zu gewährleisten. Eine geringe Menge Hämatoxylin im Zytoplasma kann jedoch die Qualität der EA-Färbung beeinträchtigen. Hauptsächlich für Proben mit wenig Schleim verwendet, um Zellablösungen in großen Bereichen während der Ansäuerung und des Spülens mit Leitungswasser zu vermeiden. Bei der Hämatoxylinfärbung ist eine tägliche Filterung erforderlich, da sonst die Kristallisation von Hämatoxylin die Färbequalität beeinträchtigt. Im Allgemeinen kann Hämatoxylinfärbemittel lange verwendet werden, daher ist die tägliche Zugabe einer kleinen Menge frischer Farbe ausreichend.
2. Alkalinisierung, auch bekannt als Rückführung zu Blau, kann durch die Verwendung von Lithiumcarbonat oder 3%iger Ammoniaklösung zur Alkalinisierung erreicht werden, mit dem Ziel einer frühen Farbentwicklung von Hämatoxylin, was einige Sekunden dauert. Wichtiger ist, dass es mit fließendem Wasser abgewaschen wird, was die blaue Farbe lebendiger erscheinen lässt. Alkalische Lösungen müssen ebenfalls gründlich gespült werden, um eine Beeinträchtigung der nachfolgenden zytoplasmatischen Färbung und Farberhaltung nach der Präparatherstellung zu vermeiden. Die Differenzierungs- und Alkalinisierungslösungen sollten mindestens täglich durch neue Lösungen ersetzt werden.
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