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Proceso de tinción nuclear de Pasteur (adhesión de portaobjetos)

Creado 06.15
Proceso de tinción nuclear de la tinción de Pasteur (adhesión de portaobjetos de vidrio)
  1. El tiempo de inmersión de la solución de hematoxilina es generalmente de 3 a 5 minutos, pero es necesario ajustarlo según la temperatura y las condiciones del tinte. En verano o cuando se utiliza tinte de hematoxilina que se ha almacenado durante mucho tiempo, el tiempo de coloración debe acortarse; En invierno o con solución de tinte de hematoxilina recién preparada y solución de tinte de hematoxilina diluida que se ha utilizado durante mucho tiempo, no es fácil de colorear, y el tiempo debe extenderse. Generalmente hay dos métodos para usar la tinción de hematoxilina:
  1. Método de sobretinción: Primero, realice conscientemente una tinción profunda y luego utilice el proceso de acidificación con ácido clorhídrico para hacer que la tinción nuclear sea más adecuada. Este método puede eliminar el colorante de hematoxilina restante adherido al citoplasma durante el proceso de acidificación, haciendo que la tinción del citoplasma sea más vívida, clara y comúnmente utilizada para especímenes con alto contenido de moco.
  2. Método de tinción ligera: En el proceso de tinción nuclear, el tiempo de tinción debe controlarse estrictamente para asegurar una tinción nuclear apropiada sin necesidad de acidificación con ácido clorhídrico. Sin embargo, una pequeña cantidad de hematoxilina en el citoplasma puede afectar la calidad de la tinción EA. Se utiliza principalmente para especímenes con menos mucosidad para evitar el desprendimiento celular en grandes parches durante los procesos de acidificación y lavado con agua del grifo. Al usar tinción con hematoxilina, es necesario filtrarla diariamente, de lo contrario, la cristalización de la hematoxilina afectará la calidad de la tinción. Generalmente, el colorante de hematoxilina se puede usar durante mucho tiempo, por lo que agregar una pequeña cantidad de colorante fresco diariamente es suficiente.
2. La alcalinización, también conocida como el proceso de volver al azul, se puede lograr utilizando carbonato de litio o una solución de amoníaco al 3% para la alcalinización, con el objetivo de un desarrollo temprano del color de la hematoxilina, lo que lleva unos pocos segundos. Más importante aún, se lava con agua corriente, lo que puede hacer que el color azul aparezca más vibrante. Las soluciones alcalinas también deben enjuagarse a fondo para evitar obstaculizar el siguiente paso de coloración citoplasmática y la preservación del color después de la preparación de la muestra. Las soluciones de diferenciación y alcalinización deben reemplazarse por soluciones nuevas al menos diariamente.
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