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Processus de coloration nucléaire de la coloration de Pasteur (fixation des lames de verre)

Créé le 06.15
Processus de coloration nucléaire de la coloration de Gram (fixation des lames)
  1. Le temps de trempage de la solution d'hématoxyline est généralement de 3 à 5 minutes, mais il est nécessaire de l'ajuster en fonction de la température et des conditions du colorant. En été ou lors de l'utilisation d'une teinture d'hématoxyline stockée depuis longtemps, le temps de coloration doit être raccourci ; en hiver ou avec une solution de teinture d'hématoxyline fraîchement préparée et une solution de teinture d'hématoxyline diluée utilisée depuis longtemps, la coloration n'est pas facile et le temps doit être prolongé. Il existe généralement deux méthodes d'utilisation de la coloration à l'hématoxyline :
  1. Méthode de surcoloration : Premièrement, effectuer consciemment une coloration profonde, puis utiliser un processus d'acidification à l'acide chlorhydrique pour rendre la coloration nucléaire plus appropriée. Cette méthode peut éliminer le colorant hématoxyline restant adhérant au cytoplasme pendant le processus d'acidification, rendant la coloration cytoplasmique plus vive, claire et couramment utilisée pour les spécimens à forte teneur en mucus.
  2. Méthode de coloration légère : Dans le processus de coloration nucléaire, le temps de coloration doit être strictement contrôlé pour assurer une coloration nucléaire appropriée sans acidification à l'acide chlorhydrique. Cependant, une petite quantité d'hématoxyline dans le cytoplasme peut affecter la qualité de la coloration EA. Principalement utilisé pour les spécimens avec peu de mucus afin d'éviter le détachement des cellules en larges plaques lors des processus d'acidification et de rinçage à l'eau du robinet. Lors de l'utilisation de la coloration à l'hématoxyline, il est nécessaire de la filtrer quotidiennement, sinon la cristallisation de l'hématoxyline affectera la qualité de la coloration. Généralement, le colorant à l'hématoxyline peut être utilisé pendant longtemps, il suffit donc d'ajouter quotidiennement une petite quantité de colorant frais.
2. L'alcalinisation, également connue sous le nom de processus de retour au bleu, peut être réalisée en utilisant du carbonate de lithium ou une solution d'ammoniaque à 3 % pour l'alcalinisation, dans le but de développer rapidement la couleur de l'hématoxyline, ce qui prend quelques secondes. Plus important encore, elle est éliminée par l'eau courante, ce qui peut rendre la couleur bleue plus vive. Les solutions alcalines doivent également être rincées abondamment pour éviter d'entraver l'étape suivante de coloration du cytoplasme et la conservation de la couleur après la préparation du spécimen. Les solutions de différenciation et d'alcalinisation doivent être remplacées par des solutions neuves au moins une fois par jour.
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