Processo de coloração nuclear de coloração de Pasteur (fixação de lâminas de vidro)

Criado em 06.15

Processo de coloração nuclear de coloração de Pasteur (fixação de lâminas de vidro)

O tempo de imersão da solução de hematoxilina é geralmente de 3 a 5 minutos, mas é necessário ajustá-lo de acordo com a temperatura e as condições do corante. No verão ou ao usar corante de hematoxilina que foi armazenado por um longo tempo, o tempo de coloração deve ser encurtado; No inverno ou com corante de hematoxilina recém-preparado e solução de corante de hematoxilina diluída que foi usada por muito tempo, não é fácil colorir, e o tempo deve ser estendido. Geralmente existem dois métodos para usar a coloração com hematoxilina:

Método de superexposição: Primeiro, realize conscientemente uma coloração profunda e, em seguida, use o processo de acidificação com ácido clorídrico para tornar a coloração nuclear mais adequada. Este método pode remover o corante hematoxilina restante aderido ao citoplasma durante o processo de acidificação, tornando a coloração do citoplasma mais vívida, clara e comumente usada para espécimes com alto teor de muco.
Método de coloração leve: No processo de coloração nuclear, o tempo de coloração deve ser rigorosamente controlado para garantir uma coloração nuclear apropriada sem a necessidade de acidificação com ácido clorídrico. No entanto, uma pequena quantidade de hematoxilina no citoplasma pode afetar a qualidade da coloração EA. Usado principalmente para espécimes com menos muco para evitar o desprendimento de células em grandes áreas durante os processos de acidificação e lavagem com água corrente. Ao usar a coloração com hematoxilina, é necessário filtrá-la diariamente, caso contrário, a cristalização da hematoxilina afetará a qualidade da coloração. Geralmente, o corante hematoxilina pode ser usado por um longo tempo, portanto, adicionar uma pequena quantidade de corante fresco diariamente é suficiente.

2. A alcalinização, também conhecida como o processo de retorno ao azul, pode ser realizada utilizando carbonato de lítio ou solução de amônia a 3% para alcalinização, com o objetivo de desenvolvimento precoce da cor da hematoxilina, o que leva cerca de alguns segundos. Mais importante ainda, é lavada com água corrente, o que pode tornar a cor azul mais vibrante. As soluções alcalinas também precisam ser enxaguadas completamente para evitar prejudicar a próxima etapa de coloração citoplasmática e a preservação da cor após a preparação da lâmina. As soluções de diferenciação e alcalinização devem ser substituídas por soluções novas pelo menos diariamente.

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